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Annexin V-kFluor594細胞凋亡檢測試劑盒(熒光顯微鏡專...

價格
電議

型號
BJ-01X6366

品牌
邦景

所在地
暫無

更新時間
2023-05-26 09:56:42

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    中文名稱:Annexin V-kFluor594細胞凋亡檢測試劑盒(熒光顯微鏡)

    英文名稱:Annexin V-keyFlour594 Apoptosis Detection Kit

    產(chǎn)品規(guī)格:10T|20T|50T|100T

    發(fā)貨周期:1~3天

    注意事項:

     

    在正常細胞中,磷脂酰絲氨酸(PS)只分布在細胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè),而在細胞凋亡早期,細胞膜中的磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。Annexin V 是一種分子量為35~36kD 的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白,與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,故可通過細胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結(jié)合。因此Annexin V 被作為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標。將Annexin V 進行熒光素kFluor594 標記,以標記了的Annexin V 作為熒光探針,利用熒光顯微鏡可檢測細胞凋亡的發(fā)生。

    本試劑盒可用于懸浮細胞以及貼壁培養(yǎng)的細胞,不適用于組織。

    操作規(guī)程

    1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

    2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

    3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及*濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

    4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

    5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

    6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

    7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

    8、結(jié)果分析

    a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(完全培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

    b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

    公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務(wù),同時提供*價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

    產(chǎn)品名稱

    英文名稱

    規(guī)格

    貨號

    Annexin V-kFluor594細胞凋亡檢測試劑盒(熒光顯微鏡)

    Annexin V-keyFlour594 Apoptosis Detection Kit

    10T|20T|50T|100T

    BJ-01X6366

    細胞培養(yǎng)方法:

    1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代

    ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

    ②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

    ③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

    ④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

    ⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

    ⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。


    2、細胞復(fù)蘇:

    ①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

    ②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。

    3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

    ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

    ②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化;

    ③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;

    ④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

    62687-22-3野菊花內(nèi)酯 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg

    15085-71-9小蕓木素 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg

    550-24-3酸藤子酚 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

    67400-17-3(S型)人參皂苷Rh2 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

    2673-40-7派利文堿 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

    490-79-9龍膽酸 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

     規(guī)格: HPLC≥98%;0.2ml

    25712-94-1高熊果酚苷 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg

    3,6-O-二啡??鼘幩?規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

    60132-35-6臭靈丹二醇 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

    83905-01-5阿奇 規(guī)格: HPLC≥98%;100mg

    白頭翁皂苷E-1 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg

    Annexin V-kFluor594細胞凋亡檢測試劑盒(熒光顯微鏡)電鏡脫鈣液  100ml|500ml

    脫鈣后堿處理液  500ml

    抗酒石酸酸性磷酸酶染色液  3×10ml|3×20ml

    酸性磷酸酶染色液(偶氮偶聯(lián)法)  3×10ml|3×20ml

    β-半乳糖苷酶染色試劑盒(細胞)  100T

    β-半乳糖苷酶染色試劑盒(組織)  100T

    細胞色素氧化酶染色液(對苯二銨法)  4×50ml

    脫鈣終點檢測試劑盒(化學(xué)法)  100T

    蔗糖-PBS溶液(5%)  500ml

    甲酸水溶液(10%)  500ml

    蔗糖-PBS溶液(10%)  500ml

     

    以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負責(zé),儀器儀表交易網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
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