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關(guān)于保存溫度:
1. 對于大多數(shù)抗體,比較合適的保存方式是分裝后保存在-20℃或-80℃。
收到抗體后請務(wù)必在 12000rpm 離心 1-5 分鐘后再打開管蓋,進(jìn)行分裝和保存。
分裝可以*大程度的減少反復(fù)凍融對抗體活性的損傷,以及從試劑瓶中多次吸取而引入的污染。分裝不宜少于10ul,以一次實驗用完*好。
對于絕大多數(shù)抗體,保存在-20℃是完全足夠了。保存在-80℃沒有明顯優(yōu)勢。
將抗體保存在冰箱里層,而不是門邊上(不要問我是怎么知道的)。
2. 大部分抗體收到后在 4℃短暫保存1-2周對抗體活性是沒有影響的。
如果抗體很快(1-2周)會使用,在4℃保存,這是為了避免反復(fù)凍融對抗體活性的損害。
但是,腹水類的產(chǎn)品請在收到后不要猶豫立即放到冰箱凍起來!因為該類產(chǎn)品含有大量的蛋白酶,長期在4℃保存會導(dǎo)致抗體的降解!
幾種抗體的保存:
1. 單克隆抗體
保存在50%的丙三醇中并存放至-20℃,或者將其保存在飽和硫酸銨中于4℃或-20℃存放。
2. 多克隆抗體
在血清中于-20℃存放,其活性丟失不大。一旦抗體被純化后,保存在50%的丙三醇中于-20℃存放,即使沒有凍融,其活性的丟失也能夠觀察到,盡管其進(jìn)程十分緩慢。
3. 特殊抗體
酶偶聯(lián)抗體需保存在 4℃,不應(yīng)凍存。凍融不僅影響抗體結(jié)合能力,還會降低酶活性。
偶聯(lián)抗體需要在棕色管中或使用錫箔紙避光4℃保存。尤其是熒光抗體,對光極為敏感,因此在所有的實驗階段也是要避光操作的!
IgG3 同型對照抗體永遠(yuǎn)保存在4℃,是為了避免凍融造成抗體變性形成多聚體,降低抗體的結(jié)合能力。
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