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淺談PCR 基本反應原理

來源: 上海博湖生物科技有限公司 >> 進入該公司展臺 2022/01/06 15:07:09 已瀏覽:次
導讀:淺談PCR 基本反應原理

從*的角度來說,PCR 由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成:


1、模板 DNA 的變性:模板 DNA 經加熱至 94℃ 左右一定時間后,使模板 DNA 雙鏈或經 PCR 擴增形成的雙鏈 DNA 解離,使之成為單鏈,以便它與引物結合,為下輪反應做準備;


2、模板 DNA 與引物的退火 (復性):模板 DNA 經加熱變性成單鏈后,溫度降至 55℃ 左右,引物與模板 DNA 單鏈的互補序列配對結合;


3、引物的延伸:DNA 模板--引物結合物在 Taq 酶的作用下,以 dNTP 為反應原料,靶序列為模板,按堿基配對與半保留復制原理,合成一條新的與模板 DNA 鏈互補的半保留復制鏈。


重復循環(huán)變性--退火--延伸三過程,就可獲得更多的「半保留復制鏈」,而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個循環(huán)需 2~4 分鐘, 2~3 小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。



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