ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡(jiǎn)稱(chēng)。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來(lái)的一種免疫酶技術(shù)。ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗C3抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗C3抗體、HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過(guò)洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的C3呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。

1．定性測(cè)定

（1）ELISA試劑盒陽(yáng)性判定值法（cut-offvalue，CO值）：一般為陰性對(duì)照的平均A值加一個(gè)常數(shù)，試劑制備嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)化，要先計(jì)算出陽(yáng)性對(duì)照A值平均數(shù)和陰性對(duì)照A值平均數(shù)。標(biāo)本A值≥CO值即為陽(yáng)性。

（2）抑制率法：在競(jìng)爭(zhēng)抑制法中結(jié)果可用抑制率表示。

抑制率（％）＝（A陰性對(duì)照A-A待測(cè)）／陰性對(duì)照X100％,一般以抑制率≥50％為陽(yáng)性試劑盒。

2.半定量測(cè)定

結(jié)果一般以滴度表示。將標(biāo)本連續(xù)稀釋后，進(jìn)行ELISA檢測(cè)，在陽(yáng)性臨界值以上的稀釋度即為該標(biāo)本的“滴度”。

3.定量測(cè)定

即用己知量的標(biāo)準(zhǔn)品作一系列稀釋后進(jìn)行ELISA試劑盒測(cè)定，與待測(cè)標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行測(cè)定，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，結(jié)果以*量或活性單位表示之。