一、服務介紹
蘇木精—伊紅染色法(hematoxylin-eosin staining),簡稱HE染色法,石蠟切片技術里常用的染色法。蘇木精染液為堿性,主要使細胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍色;伊紅為酸性染料,主要使細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)中的成分著紅色。
二、實驗原理
易于被堿性或酸性染料著色的性質(zhì)分別被稱為嗜堿性和嗜酸性,而對堿性染料和酸性染料親和力都比較弱的現(xiàn)象稱為中性。細胞內(nèi)的酸性物質(zhì)如細胞核的染色質(zhì)、腺細胞和神經(jīng)細胞內(nèi)的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及透明軟骨基質(zhì)等均被堿性染料染色,這些物質(zhì)稱為嗜堿性。而細胞質(zhì)中的其它蛋白質(zhì)如紅細胞中的血紅蛋白、嗜酸粒細胞的顆粒及膠原纖維和肌纖維等被酸性染料染色,這些物質(zhì)稱為嗜酸型。脫氧核糖核酸(DNA)兩條鏈上的磷酸基向外,帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵結合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍色,所以細胞核被染成藍色。伊紅是一種化學合成的酸性染料,在水中離解成帶負電荷的陰離子,與蛋白質(zhì)的氨基正電荷的陽離子結合使胞漿染色,細胞漿、紅細胞、肌肉、結締組織、嗜伊紅顆粒等被染成不同程度的紅色或粉紅色,與藍色的細胞核形成鮮明對比。
三、實驗流程
1.將脫蠟至水的切片放入蘇木精水溶液中染色數(shù)分鐘。
2.酸水及氨水中分色,各數(shù)秒鐘。
3.流水沖洗1 h后入蒸餾水片刻。
4.70%和90%酒精中脫水各10 min。
5.酒精伊紅染色液染色2-3 min。
6.染色后的切片經(jīng)純酒精脫水,再經(jīng)二甲苯使切片透明。
7.將已透明的切片滴上加拿大樹膠,蓋上蓋玻片封固。
四、客戶提供
組織或石蠟標本。
五、公司提供
基本實驗步驟、圖片、數(shù)據(jù)分析結果。
實驗周期:1周左右,具體需要根據(jù)實驗內(nèi)容而定。
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蘇木精—伊紅染色法(hematoxylin-eosin staining),簡稱HE染色法,石蠟切片技術里常用的染色法。蘇木精染液為堿性,主要使細胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍色;伊紅為酸性染料,主要使細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)中的成分著紅色。
二、實驗原理
易于被堿性或酸性染料著色的性質(zhì)分別被稱為嗜堿性和嗜酸性,而對堿性染料和酸性染料親和力都比較弱的現(xiàn)象稱為中性。細胞內(nèi)的酸性物質(zhì)如細胞核的染色質(zhì)、腺細胞和神經(jīng)細胞內(nèi)的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及透明軟骨基質(zhì)等均被堿性染料染色,這些物質(zhì)稱為嗜堿性。而細胞質(zhì)中的其它蛋白質(zhì)如紅細胞中的血紅蛋白、嗜酸粒細胞的顆粒及膠原纖維和肌纖維等被酸性染料染色,這些物質(zhì)稱為嗜酸型。脫氧核糖核酸(DNA)兩條鏈上的磷酸基向外,帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵結合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍色,所以細胞核被染成藍色。伊紅是一種化學合成的酸性染料,在水中離解成帶負電荷的陰離子,與蛋白質(zhì)的氨基正電荷的陽離子結合使胞漿染色,細胞漿、紅細胞、肌肉、結締組織、嗜伊紅顆粒等被染成不同程度的紅色或粉紅色,與藍色的細胞核形成鮮明對比。
三、實驗流程
1.將脫蠟至水的切片放入蘇木精水溶液中染色數(shù)分鐘。
2.酸水及氨水中分色,各數(shù)秒鐘。
3.流水沖洗1 h后入蒸餾水片刻。
4.70%和90%酒精中脫水各10 min。
5.酒精伊紅染色液染色2-3 min。
6.染色后的切片經(jīng)純酒精脫水,再經(jīng)二甲苯使切片透明。
7.將已透明的切片滴上加拿大樹膠,蓋上蓋玻片封固。
四、客戶提供
組織或石蠟標本。
五、公司提供
基本實驗步驟、圖片、數(shù)據(jù)分析結果。
實驗周期:1周左右,具體需要根據(jù)實驗內(nèi)容而定。